Fondens formål er at drive museumsvirksomhed for jernbanernes kulturhistorie i Danmark, omfattende jernbanerne i Danmark og anden til jernbanerne i Danmark knyttet virksomhed, herunder færge- og rutebildrift. Museet skal således være et museum for jernbanernes kulturhistorie i Danmark og udgøre en del af Danmarks samlede offentlige museumsvæsen. Fondens virksomhed skal gennem indsamling, registrering, bevaring, forskning og formidling belyse tilstande og forandring inden for jernbanernes kulturhistorie i Danmark og virke for sikringen af Danmarks jernbanehistoriske kulturarv. Fonden skal ved aktivt formidlingsarbejde gøre museets samlinger og viden tilgængelig for alle befolkningsgrupper.